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一、复发酵
首先将复发酵试验中，浑浊产气的LST肉汤管逐一编号① ②......
再取两支EC肉汤管，与LST管对应编号① ②......并设置一支空白对照。
注意：若小倒管内有气体，则需先将倒管内的气体排出，再进行接种操作。
之后将LST管振荡混匀，用无菌接种环，分别从每个LST管中取一环菌液，接入对应编号的EC肉汤管中；每换1管，需将接种环灼烧，保证无菌。
接种完毕后将培养箱温度设置为44.5℃，将其放置于培养箱中，培养24-48h。
培养结束后，挑选浑浊产气的EC肉汤管，进行后续的分离操作。
二、分离操作
将浑浊产气的EC肉汤管混匀，取一环菌液，划线至EMB平板（每个EMB平板编号与EC肉汤管编号对应）；同时划线标准阳性菌大肠埃埃希氏菌，同步培养作为对照。36℃培养18-24h。
三、结果观察
EMB平板上长出的黑色、有金属光泽的菌落，即为可疑的大肠埃希氏菌。后续可挑取这类菌落进一步纯化、鉴定，以确认是否为大肠埃希氏菌。