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    副溶血性弧菌的生化鉴定


    实验步骤:
    1.挑取纯培养的单菌进行革兰氏染色及氧化酶试验,副溶血性弧菌为革兰氏阴性菌,氧化酶阳性实验结果(具体实验操作详见龙8官网)。
    2.之后,用接种针从平板上挑取部分菌落至2 ml无菌生理盐水试管中,充分振荡,制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液。
    3.取一支无污染的龙8生物副溶血性弧菌生化鉴定条,用酒精棉擦拭打孔器,依次打孔,用移液枪吸取100 μl菌悬液,依次加入每个孔中。其中VP半固体需采用穿刺接种:用接种针挑取纯培养的单菌落,穿刺接种于生化管中。赖氨酸和氨基酸对照则需覆盖灭菌液体石蜡:取一支无菌液体石蜡,掰开安瓿瓶,用移液枪吸取适量液体石蜡,覆盖表层。
    4.接种完后做好标记,盖上盖子,放置36℃±1℃培养24h。
    结果观察:
    培养结束后,在记录卡上观察实试验结果。
    副溶血性弧菌应为
    无盐胰胨水和10%氯化钠胰胨水阴性,不生长;6%? 8%氯化钠胰胨水呈阳性,生长;
    氨基酸对照黄色;赖氨酸脱羧酶阳性,紫色;甘露醇阳性,变黄;
    VP半固体:动力阳性;加入vp试剂混匀后4h内不变色,为vp阴性;
    ONPG阴性,不变色。

    注意事项:
    V-P试验过程中,在培养结束后需加VP试剂(甲液:0.3ml,乙液:0.1ml),混匀后4 h内观察结果。


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