沙门氏显色培养基是青岛龙8生物公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中沙门氏菌的快速检测。除伤寒沙门氏菌(在培养基上显无色)不能直接鉴定外,其它沙门氏菌显亮红色,大肠杆菌和大肠菌群显蓝色,枸橼酸杆菌显紫色,其它细菌显黄色或无色。在食品污染中,主要的沙门氏菌为非伤寒沙门氏菌外的其它沙门氏菌,本培养基的特异性非常高,可达 98%,是一种很理想的快速检测培养基。
成份(g/L)
特殊营养物质
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21.0
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显色剂
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0.25
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琼脂
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15.0
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pH 7.3±0.1 25℃
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添加剂:15ml(已配套,无需另购)
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法
称取本品 7.26g 加入 200ml 蒸馏水,加入添加剂 3ml,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 1-2 分钟。冷却至 45-50℃ 时,倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在超净工作台中开盖吹15-30分钟。
检验原理
利用沙门氏菌自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色,以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色因子使菌落显示颜色。
操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取 1ml 样品液加入 9ml RVS肉汤或其它选择性增菌肉汤中,36℃±1℃ 增菌培养 24±2 小时;
3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到沙门氏菌显色培养基上,做 2 个平板;
4、36℃ 培养 24~28h,沙门氏菌(伤寒沙门氏菌除外)显亮红色,大肠杆菌和大肠菌群显蓝色,枸橼酸杆菌显紫色,其它细菌显黄色或无色;
5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做沙门氏菌全套生化试验和血清学试验(本公司有生化鉴定管套装)。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡红色。制备好的平板呈淡红色固体。
2、微生物试验
在 36℃ 培养 24~28h 小时:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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单增李氏菌
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09114
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-/+
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无色
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-/+
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无色
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大肠杆菌
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25922
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+++
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蓝色
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沙门氏菌
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14028
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+++
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亮红色
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阴沟肠杆菌
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23355
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+++
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蓝色
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产气肠杆菌
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35029
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+++
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蓝色
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弗氏柠檬酸盐杆菌
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43864
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+++
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紫色
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方法的局限性
本培养基不能直接鉴定伤寒沙门氏菌,其它沙门氏菌的特异性可达 98%,准确性非常高,有时可能需做其它补充试验。
贮存
制备好的平板可保存 2-5天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、BENETT, A.R., et al.: Evaluation of Rambach Agar and Salmosyst Enrichment for the isolation of Salmonella from foods. Congress-Poster RAMI, London; September 1993.
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沙门氏菌显色培养基微生物质控结果:
大肠杆菌:蓝绿色菌落;沙门氏菌:粉红色菌落
沙门氏菌显色培养基(1000ml)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-28小时。
相关资料:
操作视频|培养基的加热灭菌操作(以XLD 、SC为例)-点击查看实验操作视频
使用说明书 点击下载