一、用途：

 用于检验弧菌的β-半乳糖苷酶的产生能力，亦可用之鉴别迟缓发酵糖细菌与乳糖阴性细菌。

二、实验原理：

 细菌分解乳糖依靠两种酶的作用，一种是β-半乳糖苷酶渗透酶，它位于细胞膜上，可送乳糖分子渗入细胞，另一种β-半乳糖苷酶，亦称乳糖酶，位于细胞内，能使乳糖水解成半乳糖和葡萄糖。

 具有上述两种酶的细菌，能在24-48h发酵乳糖，而缺乏此两种酶的细菌，不能分解乳糖。乳糖迟缓发酵菌只有β-半乳糖苷酶而缺乏β-半乳糖苷渗透酶，因而乳糖进入细胞很慢，需经培养基中1%乳糖较长时间的诱导，产生相当数量的渗透酶后，才能较快分解乳糖，故呈迟缓发酵现象。

 ONPG可迅速进入细菌细胞，被β-半乳糖苷酶水解，释放出黄色的临位硝基苯酚，故由培养液变黄可迅速测知β-半乳糖苷酶的存在，从而确定该菌为乳糖迟缓发酵菌。

三、试验方法：

 1.用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈，掰开待用；

 2.将待检培养物接种3%氯化钠三糖铁琼脂，36±1℃培养18h；

 3.挑取1满环新鲜培养物接种于生化管中，在通风橱中滴加1滴甲苯，摇匀后置37℃水浴5min后，置于36±1℃培养24h，观察实验结果。

四、结果观察与解释

 接种以下质控菌株，在36±1℃培养18-24小时：

3%Nacl ONPG生化管质控结果

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