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    月桂基硫酸盐蛋白胨MUG培养基的原理及实验现象

    王娟  
    录入时间:2018-11-20 13:52:27 来源:青岛龙8生物

    一、试验原理:

     本培养基用于大肠杆菌的O157:H7的测定(SN/T0973-2000)。

     胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群细菌的生长。大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β- D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮 在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶;而致病性大肠杆菌(包括O157:H7)不具有葡萄糖醛酸苷酶,因而不会产生荧光。

    二、培养基配方(g/L):

    胰蛋白胨

    20.0

    氯化钠

    5.0

    乳糖

    5.0

    磷酸氢二钾

    2.75

    磷酸二氢钾

    2.75

    月桂基硫酸钠

    0.1

    pH 6.8±0.2  25℃

    三、操作步骤:

     1、制备质控菌液。

     2、把质控菌液加入试管中。

     3、在36±1℃培养24小时,记录实验结果。

    四、微生物试验结果:

     接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-24小时:

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    生长情况

    其他特征

    大肠埃希氏菌

    ATCC25922

    >5000

    +++

    产气,有荧光

    大肠埃希氏菌0157

    ATCC35150

    >5000

    +++

    产气,无荧光

    伤寒沙门氏菌

    ATCC14028

    >5000

    +++

    不产气,无荧光

    金黄色葡萄球菌

    ATCC25923

    >5000

    +++

    抑制

     

    图1-2  月桂基硫酸盐蛋白胨MUG培养基微生物质控结果

    备注:A:正常情况下拍摄,B:366nm紫外灯下拍摄;

    a:大肠埃希氏菌O157,b: 大肠埃希氏菌,c: 伤寒沙门氏菌,d:金黄色葡萄球菌,e:空白对照


    五、方法的局限性

     本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

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     注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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