用途：用于菌落总数测定（GB/T4789.9-2003和GB/T4789.28-2003）。

原理：蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；氯化钠能维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；大多数细菌能还原TTC，使之形成易于辨别的红色菌落，TTC还能减缓某些细菌的蔓延生长。

操作步骤：

使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。

1、制备质控菌液。

2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液1ml，接种到两个无菌平皿中，将10ml-15ml冷至45-50℃的TTC营养琼脂倾注于每个平皿中。小心旋转平皿，将培养基和目标菌质控菌液充分混匀。待琼脂凝固后，再加入3ml-4ml的TTC营养琼脂覆盖平板表层，以TSA为参比培养基。

3、36±1℃倒置培养基培养48±2小时，记录实验结果。

微生物试验：

接种以下质控菌株，36±1℃倒置培养基培养48±2小时： 

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	参比或计数 培养基	方法	质控评定标准	其他特征
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	20-200	TSA	定量	PR≥0.7	淡红色菌落
大肠埃希氏菌	ATCC25922	20-200			PR≥0.7	淡红色菌落
伤寒沙门氏菌	ATCC14028	20-200			PR≥0.7	淡红色菌落
铜绿假单胞菌	CMCC27853	20-200			PR≥0.7	淡红色菌落

 

图1-2  TTC营养琼脂微生物质控结果

备注：a:金黄色葡萄球菌，b:大肠埃希氏菌，c:伤寒沙门氏菌，d: 铜绿假单胞菌

方法的局限性

本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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