1、修订说明

在2010年版的抑菌剂效力检查法指导原则基础上，并参照欧洲药典对抑菌及效力检查法的判断标准进行修订而成。

2、主要修订内容

2.1在概述部分增加抑菌剂的定义：抑菌剂是指抑制微生物生长的化学物质，有时也称防腐剂。

2.2培养基、培养基适用性检查、菌液制备

   胰酪胨大豆肉汤培养基→胰酪大豆胨液体培养基

   胰酪胨大豆琼脂培养基→胰酪大豆胨轻质培养基

   培养时间：48/72h→不超过3天/不超过5天

   pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液

2.3培养基适用性、方法的适用性试验中各试验菌的回收了按70%要求。

2.4产品分类及判断标准按EP进行修改，根据给药途径分为三类

2.5结果判断中的初始值定为所加菌数值（取消0时）

3、抑菌效力检查法的应用

   采用微生物方法测定灭菌及非灭菌制剂的抑菌活性，已评价最终产品的抑菌效力。

3.1用于评价最终产品的抑菌效力

3.2用于指导生产企业在制剂研发阶段抑菌剂最低浓度的确定。

   供试品和抑菌剂理化性质分析→抑菌剂配比浓度预实验→抑菌剂配比浓度证实试验

4、抑菌效力检查法在值机通则中的体现

   在2015年版中国药典附录一制剂通则中相关的制剂项下“生产与贮存期间应符合如下规定”中增加“加入抑菌剂（防腐剂）的制剂，应符合抑菌剂（防腐剂）效力检查法的有关要求”

5、抑菌及效力检查实验

5.1培养基的适用性检查

   A培养基

   胰酪大豆胨液体

   胰酪大豆胨琼脂

   沙氏葡萄糖液体

   沙氏葡萄糖琼脂

   B试验用菌株

   金黄色葡萄球菌

   铜绿假单胞菌

   大肠埃希菌

   白色念珠菌

   黑曲霉

   C试验用菌株培养

   培养基      胰酪大豆胨琼脂/液体     沙氏葡萄糖琼脂/液体

   菌种        金葡、大肠、铜绿        白念、黑曲

   培养条件    18-24小时（30-35℃）    白念：24-48h（20-25℃） 

                                       黑曲霉：5-7天或直到获得丰富的孢子（20-25℃）

   D菌液的制备及加菌量

     分别用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9％无菌氯化钠溶液稀释至合适浓度

   加菌量：不大于100cfu/皿

   菌液放置：室温2小时：2-8℃24小时；黑曲霉孢子悬液--验证的贮存期内

   E结果判断

   比较所使用培养基与对照培养基计数/生长情况，70%为合格限度，≥70%，所用培养基合格。

5.2抑菌效力测定

A、菌种

   同培养基适用性

B、菌液制备

   同培养基适用性0.9%无菌氯化钠溶液

   选择较浓菌液进行抑菌效力测定，一般106-108cfu/ml

C、供试品接种

   将菌液分别接种入供试品中，混匀，置20-25℃避光贮存

注意：接种量：每1g或1ml样品接种105-106cfu

      接种菌液体积不得超过供试品体积的1%（菌液100倍浓于最终的浓度）

      尽量接种入原包装

      接种菌液后，将样品充分混合

D、存活数测定

   采用验证后的方法，按照各品种项下规定的时间取样，测定存活菌落数。计算1ml/1g供试品各试验菌所加菌数级间隔时间的菌数的1g值。

注意：方法适用性菌株同前（培养基适用性，与计数法不同）

      方法适用性试验回收率要求同前（70%）

      对照菌液平行制备

      时间安排与控制

      Lg值保留小数点后1位有效数字

E、结果判断

上一篇：下一篇：纯化水及注射用水标准(2015版药典)