一、目的

放线菌是介丁细菌与真菌之间的一类微生物，其菌体为丝状体，伸人培养基内的为基内菌丝，也称营养菌丝，生长在培养基表面的为气生菌丝。气生菌丝的上面可分化形成孢子丝，有各种形状，如直立、波浪、螺旋等。孢子丝可进一步分化形成孢于，孢子的形状大小也不相同，是分类的重要依据。

放线菌的菌落早期和细菌菌落相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色，
呈同心圆放射状。

通过实验认识放线菌的菌丝及孢子丝的形态和放线菌的菌落特征。

二、材料

显微镜、载玻片、酒精灯、接种环、石炭酸复红、解剖刀、盖玻片、培养皿、高氏1号合成培养基、丰加链霉菌及菌落。

三、方法与步骤

（一）水浸片法的制作及观察

（1）取洁净载玻片，滴加无菌水一滴。

（2）用接种环挑取经过28~30℃培养4~5d的放线菌菌落少许，置于载玻片的无菌水滴内。

（3）取洁净盖玻片一块，先将盖玻片，端与液滴接触，然后将整个玻片慢慢放下避免产生气泡。置于显微镜下用高倍镜观察。

(二）印片法的制作及观察

此法的优点是不打乱孢子的排列状态。

1.取菌 取2片干净的载玻片，用解剖刀切取一个完整的放线菌菌落（带培养基切下），放在一载玻片的中央（注意菌落应正放）。然后将另一载玻片在酒精灯下微微加热后,盖在这一菌落上面，用接种环或解剖刀轻轻按压，然后小心拿下上面这块玻片（不可在菌落上移动）。

2.固定 将取下的这块玻片，通过火焰固定。

3.染色 用石炭酸复红染色30s，然后水洗，风干。

4.镜检

(三〉埋片法的制作及观察

(1)将培养基融化后倒入平板，待凝固后挑取少量放线菌孢子接人培养基上，在接种线旁倾斜插人无菌盖玻片。

（2）28〜30℃培养4〜5d后，菌丝沿玻片向上生长，待菌丝长好后，取出玻片放在一干净载玻片上，置于显微镜下观察。

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