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      微生物限度检查法——供试液的制备



      录入时间:2008-10-20 11:44:59 来源:青岛龙8 

         
         按供试品的理化特性与生物学特性可采取适宜的方法制成供试液。
          1 、液体供试品  取供试品10ml,加入90ml稀释剂中,混匀,作为供试液。油剂可
      加适量吐温80;气雾剂以适宜方法使抛射剂导出后,加入适量稀释剂,混匀,吸取相当
      10g或10ml供试品,再稀释成100ml作供试液;合剂(系指含王浆或蜂蜜者,下同)与滴
      眼剂可用供试品作为供试液。
          2 、固体、半固体或粘稠液  供试品称取供试品10g,置0.9%无菌氯化钠溶液100ml
      中,用匀浆仪或其它适宜方法,混匀后,作为供试液。在制备过程中,必要时可加适量
      吐温80,并适当加温,但不应超过45℃。
          (1)非水溶性供试品  称取供试品10g(10ml),加入灭菌吐温80  30ml、灭菌液体石
      蜡10ml与0.9%无菌氯化钠溶60ml(或50ml),同置匀浆仪中,乳化,或其它适发法乳化,
      作供试液。在制过程中,必要时可适当加温,但不应超过45℃。
          (2)不溶于水的膜剂供试品  取规定量,剪碎,加稀释剂100ml(必要时可增加稀释
      剂),浸泡,振摇,作为供试液。
          (3)肠溶胶囊(片)供试品  称取供试品10g,置含无菌磷酸盐缓冲液(pH6.8)100ml
      的锥形瓶内。于45℃水浴中,保温、振摇、使溶解,作为供试液。
          3 含抑菌成分供试品  供试品如干扰控制菌检验,按以下方法处理后,依法检查。
          (1) 稀释法  将供试液种入较大量的培养基中,使该供试液稀释至不具抑菌作用的
      浓度。
          (2) 离心沉淀集菌法  取规定量的供试液,离心(3000转)30分钟,弃去上清液,留
      底部集菌液约2ml ,再稀释成原规定量的供试液。如有不溶性药渣,可先离心(500转)5
      分钟,取全部上层液,再行集菌处理。
          (3) 薄膜过滤法  取规定量的供试液,置稀释剂100ml中,摇匀,以无菌操作加入装
      有直径约50mm、孔径不大于0.45±0.02μm微孔滤膜的薄膜过滤器内,减压抽干后,用稀
      释剂冲洗滤膜3次,每次50~100ml,取出滤膜备检。
          (4) 中和法  凡含磺胺、汞、砷类或防腐剂的供试品,可用相应的试剂钝化活性因
      子,中和毒性后制成供试液。
          对照用菌液
          控制菌检查均应作相应已知菌的对照试验。对照菌株为大肠杆菌[CMCC(B)44102]、
      沙门氏菌〔CMCC(B)50094〕、绿脓杆菌〔CMCC(B)10104〕及金黄色葡萄球菌〔CMCC(B) 
      26003〕。
          取相应菌株的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳,接种至营养肉汤培养基内,
      培养18~20小时后,稀释至1:10<6>。 对照菌的加入量为50~100 个。

       

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