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          载玻片凝集试验



          录入时间:2013-12-18 10:14:49 来源:龙8生物

          将细胞的抗原和单一的抗体混合后会发生凝集现象。抗原和抗体反应的结果是细菌细胞凝结成块,形成絮状物或密集的微粒。对于肠杆菌科细菌,如果是“H”型抗原(即鞭 毛抗原)和它的单一抗体发生的反应,形成絮状物;如抗原是“0”型抗原(即菌体抗原),则 形成更为密集的微粒凝块。

          市售的抗体有两种类:能与特定菌属或几种血清发生反应的多价抗体,适用于做 初步的检测;特定的单克隆抗体,用于鉴别菌种特定的血清型。瓶装的抗体应置于4~7℃的暗处存放,在这种存放条件,它们的使用有效期要比标示的时间长几个月。但需 要定期地对抗体的实际效价(或浓度)进行测定。

          13.2.1载玻片凝集试验

          操作步骤

          (1) 取一块干净、去油脂的载玻片,用蜡笔将其分成3部分,并分别标上“H”O’和 "C” (对照);

          (2) 在标有“C”的部分加上1〜2菌环生理盐水;

          (3) 在标有“H”的部分加上】滴用甲醛处理过的细菌悬浮液(见下),在标有“0”的部 分加1滴经加热处理过的细菌悬浮液(见下);

          (4) 在标有“H”部分再加人1环没有稀释的多价“评’抗血清,使其与细菌悬浮液混合;

          (5) 在标有“O”的部分再加入1环没有稀释的多价“0”抗血清,使其与细菌悬浮液 混合;

          (6) 轻轻地前后晃动载玻片,在暗背景下观察3min,如发生凝集反应,通常在30S内 会有细菌凝块形成,对照部分不应有任何变化。

          注意:每一次都必须先将接种环灼烧,冷却后再转移细菌悬浮液,这一操作步骤很 重要

          对于可疑的沙门氏菌,推荐使用多价的沙门氏菌“O”抗体载玻片凝集试验验征。如 为阴性反应,用1~2组多价“H"抗体重复试验。如依旧为阴性反应,再用伤寒沙门氏菌 的“Vi”抗体重复试验。如需对发生凝集反应的菌种做进一步的鉴别,可使用 单一的血清因子。Harvey和Price(1961,1974)介绍过一个鉴别沙门氏菌H-抗原组的简 单方法,如果需要对一些特殊的血清进行鉴别可使用该方法。

           

           


           

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