国家　  受支原体污染(%)  报告年度

USA－FDA  15  1993(past 30 years)

USA－ATCC  15-20  1992

Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22  1981 1987-19931998

Germany－DSM  36  1990-1994

Argentina  65  1987

Israel  32  1986-1993

China  95   1990

 

造成支原体高污染率的原因为： 

1.支原体size 0.1~0.8 um，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22-0.45 um） 

2.支原体污染时，没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化 

3.过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式 

4.细胞流通间缺乏品管，造成实验室间的相互污染 

5.研究或操作人员忽略污染问题 

 

1.  已受污染的细胞 

2.  操作人员的疏失 

3.  已受污染的培养基、血清 

4.  操作环境不良、实验器具不洁等 

由于支原体为人体口腔中之正常菌丛，实验室之操作人员的污染亦可能为污染源，须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时，最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞株。但是若是坚持要作去除支原体污染，有以下几种方法，只不过结果会与原始的细胞特性有差异。

 

去除支原体污染： 

1. 抗生素处理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（Bayer），Enrofloxacin（Bayer） 

2. Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine 

3. Anti-sera 

 

 设备方面： 

1.  使用已作支原体测试ok之细胞株 

2.  于另一隔离之区域操作未知是否有支原体污染之细胞 

3.  使用不添加抗生素的培养基培养细胞 

 检测方面：定期以标准的支原体检测方法检测细胞、培养基、血清、ddH2O有否被支原体污染。

 实验操作人员之无菌观念与无菌操作技术之要求