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    沙门氏菌的致病性及其检验



    录入时间:2011-4-29 9:05:44 来源:食品伙伴网

    致病性
    1、沙门氏菌经口进入人体以后,在肠道内大量繁殖,经淋巴系统进入血液,造成一过性菌血症,即感染过程。
    2、随后,沙门氏菌在肠道和血液中受到机体的抵抗而被裂解、破坏,释放大量内毒素,使人体中毒,出现中毒症状。
     
     
    主要症状
    •        急性胃肠炎:潜伏期为6~12h,最长可达24h,病人临床表现为恶心、头痛、出冷汗、面色苍白,继而出现呕吐、腹泻、发热,体温高达38~40℃,大便水样或带有脓血、粘液,中毒严重者出现寒战、惊厥、抽搐和昏迷等。此菌中毒死亡率较低。
     
     
    流行病学特点
    1.季节性特点:全年皆可发生,多见于夏、秋两季。
    2. 原因食品:主要为动物性食品,特别是畜肉类及其制品,其次为禽肉、蛋类、乳类及其制品,由植物性食品引起者很少。
    3. 食品中沙门氏菌的来源:(1)家畜、家禽的生前感染和宰后污染;(2)乳中;(3)蛋类;(4)熟制品
    4. 沙门氏菌食物中毒发病率较高,占总食物中毒的40%~60%,最高可达90%。
     
     
    检验
    食品中沙门氏菌的检验方法,应按《中华人民共和国国家标准——食品卫生微生物学检验  沙门氏菌检验方法》(GB/ T4789. 4—2003)进行。
    主要程序: 前增菌和增菌  分离  生化试验  血清学分型鉴定(O、H、Vi抗原的鉴定)  结果报告
    前增菌:冷冻的肉类、蛋制品、乳制品等加工食品。
    –    方法是将样品25g(mL)用缓冲蛋白胨水(BP)225mL匀浆后于37℃培养4h。
    选择性增菌——MM(TTB)及SC
    –    前增菌后的样品。取10mL加入到100mL选择性增菌液中培养18~24h。
    –    鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其它未经过加工的食品、病人样品等。可直接取样品25g(mL)用盐水混匀,并用MM(TTB)及SC进行选择性增菌。
    细菌分离与菌落挑选
    1.取上述增菌培养物分别划线接种于BS琼脂平板和DHL(或HE、WS或SS)琼脂平板各一个,经37℃培养18~24h(DHL、HE、WS、SS)或40~48h(BS),观察菌落形态。
    2.挑选可疑菌落3~5个接种于三糖铁(TSI)琼脂斜面,37℃培养18—24h。
     
                       表 肠杆菌科各属在三糖铁(TSI)上的反应结果                                    
    斜面
    底层
    产气
    H2S
    可能的菌属和种
    -
    +
    +/-
    +
    沙门氏菌属、弗劳地氏柠檬酸菌、变形杆菌属、缓慢爱德华氏菌
    +
    +
    +/-
    +
    沙门氏菌Ⅲ、弗劳地氏柠檬酸杆菌、普通变形杆菌
    -
    +
    +
    -
    沙门氏菌属、大肠埃希氏菌属、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌、普罗菲登斯菌属
    -
    +
    -
    -
    伤寒沙门氏菌、鸡沙门氏菌、志贺氏菌属、大肠埃希氏菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌、普罗菲登斯菌属
    +
    +
    +
    -
    大肠埃希氏菌、肠杆菌属、克雷伯氏菌属、沙雷氏菌属、弗劳地氏柠檬酸杆菌
     
    血清学鉴定  由于引起人和动物发病的沙门氏菌绝大多数分布于A—F群中,所以通常只需做A—F群O抗原成分和H抗原鉴定即可判定沙门氏菌的血清型。
    (1)O抗原鉴定:首先用市售A-F多价抗O血清做玻片凝集试验。出现凝集后,再用代表6个O群的O因子血清,逐一检查,以确定待检菌属于哪个O群。
    (2)H抗原鉴定:一般最好使用163种规格诊断血清中的8个H多价血清来检查方法,类似于O抗原鉴定
    (3)Vi抗原鉴定:用Vi因子血清检查。
    生化学鉴定  鉴定沙门氏菌的生化试验主要有:
    硝酸盐还原试验    鸟氨酸和赖氨酸脱羧酶试验    靛基质    pH7.2尿素    ONPG    水杨苷 卫矛醇    山梨醇    动力    KCN    丙二酸盐试验
    沙门氏菌的快速检验方法:
    1.荧光抗体法(以前列入进出口检验专业标准)  2.E-15快速生化鉴定系统检查法  3.噬菌体裂解法
    4.酶联免疫吸附试验(ELISA)、DNA探针技术、PCR技术等

     

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