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    平酸菌及其检验



    录入时间:2010-11-3 9:48:10 来源:中国食品商务网

     

    一、平酸菌简介
       
    引起罐头食品酸败变质而又不胖听(即产酸不产气)的微生物在罐头工业上称为平酸菌。它是需氧芽胞杆菌科中的一群高温型,具有嗜热、耐热的特点,其适宜生长温度为4560℃,最适生长温度为5055℃,在37℃生长缓慢,多数菌种在pH6.8-7.2生长良好,少数菌种能在pH5.0生长,广泛分布于土壤,灰尘和各种变质食品中。造成罐头食品平盖酸败的细菌,从微生物学分类来分,主要有二种:通常是嗜热脂肪芽胞杆菌,凝结芽胞杆菌。
       
    嗜热脂肪牙胞杆菌:(Bacillus stearothermo philus)
       
    革兰氏阳性菌,能运动,周生鞭毛。芽胞椭圆形,亚端生或端生,通常使孢囊膨大,最高生长温度6575℃。能够葡萄糖产酸,水解淀粉。
       
    凝结芽胞杆菌:(Bacillus Coagulans)
       
    革兰氏阳性,能运动,周生鞭毛。芽胞椰圆形或柱状,一次端生或端生,偶尔中生,有些菌株孢囊膨大不明显,有些菌株的孢囊大。最高生长温度5560℃,最低生长温度1525℃。接触酶阳性,葡萄糖产酸。
       
    二、罐头食品中平酸菌的检验方法
        1
    .试样制备:
       
    罐头样品预先经55℃保温一周,然后按正常方法进行开罐,吸取内容物液体1毫升,如为固体内容物则取1,以无菌手续接种于3#培养基中,每罐接种2支。
        2
    .增菌培养
       
    接种试样的3#培养基试管,于55℃培养48小时,如发现指示剂由紫变黄即判断为阳性,同时进行涂片镜检为芽胞杆菌(有时不易检到芽胞),如阳性需继续培养48小时。
        3
    .纯分离培养
       
    将阳性培养基试管划线接种于3#培养基琼脂平板55℃培养48小时,检查有无可疑菌落(菌落黄色,周围有黄色环,中心色深不透明),如有可疑菌落则接种于普通琼脂斜面和芽胞培养基斜面,55℃培养24小时,涂片镜检观察有无芽胞,以及芽胞的形状及位置,并同时以普通琼脂斜面培养物进行生化学试验。
        4
    .鉴别:
       
    菌体形态:为革兰氏阳性芽胞杆菌。
       
    生化反应:取上项斜面培养物按下列项目进行鉴别。
       
    平酸菌生化反应鉴别表

    项目

    菌别

    60

    培养

    酸盐

    葡萄

    基质

    VP

    反应

    7NaCL

    肉汤

    柠檬

    酸盐

    酸性

    胰胨

    嗜热脂肪芽胞杆菌

    生长

    d +

    +

    不生长

    凝结芽胞杆菌

    不定

    d-

    +

    b

    生长


       
    注:+为产酸或阳性,-为阴性
        d
    +:5085%的阳性
        d
    -:15--49%的阳性
        b
    :2549%阳性
        45
    55℃培养三天后无反应报告为阴性。
        5
    .培养基的配方
        ①3
    #葡萄糖肉汤培养:
       
    蛋白胨 5 葡萄糖 5
       
    酵母浸膏 1 牛肉膏 5
       
    可溶性淀粉 1 黄豆浸出液 50mL
       
    1000mL 0.4%溴甲酚紫 4mL
        pH 7.0-7.2
        115℃
    高压灭菌15min
        ②3
    #培养基琼脂:
        3
    #葡萄糖肉汤 1000mL
       
    琼脂 1820
        pH 7.2
    7.4   121℃高压灭菌15min
        ③
    酸性胰胨琼脂
       
    胰蛋白胨 5 酵母膏 5
       
    葡萄糖 5 K2HPO4 4
       
    1000mL 琼脂 18221520g)
       
    琼脂粉 12
        pH5.0  121℃
    高压灭菌15 min
        ④7%NaCL
    肉汤
       
    蛋白胨 5 牛肉膏 3
        NaCL 70
    1000mL
        pH7.0 121℃
    高压灭菌15min
        ⑤
    芽胞培养基
       
    牛肉膏 10 蛋白胨 10
        NaCL 5 K2HPO4 3
        (K2HPO4 3H2O 3.9
        MnSO4 0.03
    琼脂 25
        pH 7.2 121℃
    高压灭菌15min
        ⑥V
    P培养基
       
    蛋白胨 5 葡萄糖 5
        K2HPO4 5
    蒸馏水 1000mL
        pH7.2 121℃
    高压灭菌15min
        ⑦
    西蒙氏枸橼酸盐琼脂(柠檬酸盐)
        NaCL 5
    硫酸镁 0.2
       
    磷酸铵(NH4H2PO41 磷酸氢二钾K2HPO41
       
    枸橼酸钠 5
       
    琼脂 20 蒸馏水 1000mL
        0.2
    %溴麝香草酚兰酒精溶液 40mL
        pH 6.8 121℃
    高压灭菌15min
        ⑧
    童汉氏蛋白胨水
       
    蛋白胨 10 NaCL 5
       
    蒸馏水 1000mL pH 7.4
        121℃
    高压灭菌15min
        ⑨
    硝酸盐肉汤
       
    牛肉膏 3 蛋白胨 5
       
    硝酸钾 1 蒸馏水 1000mL
        pH 7.0 121℃
    高压灭菌20min(15min)

     

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