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      粗糙链孢霉培养基



      录入时间:2010-10-26 13:13:04 来源:互联网

      七种粗糙链孢霉培养基

      (1)基本培养基 

      柠檬酸·2H2O(Na3C6H5O7·2H2O)
      3.0g
      KH2PO4
      5.0g
      NH4NO3
      2.0g
      MgSO4·7H2O
      0.2g
      CaCl2·2H2O
      0.1g
      微量元素溶液(见(3))
      1.0ml
      生物素溶液(10mg/ml)
      1.0ml
      蔗糖
      20.0g
      琼脂
      15.0g
      加蒸馏水至1000ml

      (2) 杂交培养基 

      KNO3
      1.0g
      KH2PO4
      1.0g
      MgSO4·7H2O
      0.5g
      NaCl
      0.1g
      CaCl2·2H2O
      0.1g
      微量元素溶液(见(3))
      1.0ml
      生物素溶液(10mg/ml)
      1.0ml
      蔗糖
      20.0g
      琼脂 
      15.0g
      加蒸馏水至1000ml

      (3)微量元素溶液(基本培养基和杂交培养基用) 

      柠檬酸·H2O
      500mg
      ZnSO4·7H2O
      500mg
      Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O
      100mg
      CuSO4·5H2O
      25mg
      MnSO4·4H2O
      5mg
      H3BO3 
      5mg
      Na2MoO4·2H2O 5mg
      加蒸馏水至100ml

      (4)补充培养基 

      在基本培养基上补一种或多种生长物质,如氨基酸、核酸碱基、维生素等。氨基酸用量一般是100ml基本培养基中加5~10mg。 

      本实验所用补充培养基只要在基本培养基中适量的赖氨酸,赖氨酸缺陷型菌株就能生长。

      (5)完全培养基 

      基本培养基
      1000ml
      酵母膏
      5g
      麦芽汁(亦可省)
      5g
      酶解酪素
      1g
      维生素混合液 

      硫胺素
      100mg
      核黄素
      5mg
      吡哆醇
      5mg
      泛酸钙
      50mg
      对-氨基苯甲酸
      5mg
      菸酰胺
      5mg
      胆碱
      100mg
      肌醇
      100mg
      叶酸
      1mg
      蒸馏水
      1000ml
      蔗糖
      20g
      (为获大量分生孢子,可用1%的甘油代替蔗糖)。 

      加2%琼脂,即为固体完全培养基。 

      (6)马铃薯培养基 

      将马铃薯洗净去皮,切碎,取200g,加水1000ml,煮热,然后纱布过滤,弃去残渣,滤下的汁加2%琼脂,20g蔗糖,煮融,分装到试管中。亦可将马铃薯切成黄豆大小碎块,每支试管放4~5块,再加入融入化好的琼脂,蔗糖。 

      上述培养基分装试管后,55.2kPa(8磅)灭菌30分钟,取出摆成斜面,可代替完全培养基使用。 

      (7)玉米杂交培养基 

      将玉米浸泡软化,破碎,每管3~4粒,加入少量琼脂(0.1g左右),加棉塞消毒,即成,不需碎面。


       

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