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    《水生微生物实验法》——红螺菌属的富集培养与分离



    录入时间:2010-9-10 15:35:12 来源:青岛龙8

     

    (十六)红螺菌属的富集培养与分离

    其中包括红色红螺菌( 或称深红红螺菌)、度光红螺菌、巨大红螺菌、长形红螺菌、纤细红螺菌(或称细小红螺菌)、棕黄色红螺菌(或称黄褐红螺菌),此类细菌均生长于水和淤泥中,属厌氧或微嗜氧菌,在厌氧条件下.于光亮中能合成有机物.细胞螺旋状盘绕,长度不一,有不等数蜷曲.同种细胞的大小变化很大,有端生丛毛,能运动。细胞内含有菌紫素。菌绿素和类胡罗卜素等.故细菌呈红色、褐红色、绛红色或玫瑰色不一。

    1 .富集培养

    1)培养基成分及配制:

    NH4Cl   1.0

    K2HPO4    0.5

    MgCl2    0.2

    NaCl    0.1

    酵母膏   0.1

    H2O  900毫升

    将上面各物溶解于水,在121 蒸汽下灭菌20 分钟。分别制备及过滤除菌下列各液:

    5碳酸氢钠加50 毫升蒸馏水溶解。

    ② 乙醇或4%丙氨酸.

    0.1N的磷酸溶液。

    在基础培养基中加入碳酸氢钠溶液和1.5-2.0毫升乙醇或50毫升4%丙氨酸.用0.1N的磷酸调pH 7.0

    2)富集培养:

    ① 最适的接种物是暴露在光下的富含有机物的淤泥。接种时,放淤泥于50 毫升的带玻璃塞的磨口瓶中.酌量放一层。

    ② 加满培养基,塞好塞于, 隔绝空气。

    ③ 置于30 的照明箱中培养,培养物放在离照明的25 瓦钨丝灯4 英寸处。

    ④ 观察   通常在3 天内可见到液体培养基里和淤泥曝光的一侧呈现微红色的生长物。

    ⑤ 从微红色处取1 毫升的富集培养物,接种于第二瓶的富集培养基中,培养2 天.

    2 .分离培养

    1)培养基成分及配制:从上面的富集培养基中加酵母膏至0.2%,及1.5-2.0琼脂(但碳酸氢钠应改为2 ),制法同上。

    另取Na2S·9H2O   1 ,加水10 毫升,于121 蒸汽下灭菌15分钟,在调pH 之前将此液加到分离培养基中,分装,灭菌后制成平板或柱状培养基。

    2)接种:取富集培养物于分离平板培养基上划线或涂布接种.或用摇管法于柱状培养基中分离.后者由于硫化钠在培养基深处把氧气迅速消耗,很快就形成厌氧条件。如用前一种分离法,可用焦性没食子酸和碳酸钠造成厌氧条件.或于其他的缺氧条件下培养

    挑选具有此类细菌特征的菌落.作穿刺接种,管口塞紧后封蜡,培养,备用。

     

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