微生物菌种常规保藏是一类重要的基本操作技术，广泛应用于科学研究、教学及生物技术产业，是保护微生物菌种资源的重要手段，是科研教学及生物技术产业正常运转的重要保障。本规程包括定期移植保藏法、液体石蜡保藏法和沙土管保藏法三种常用微生物菌种保藏方法。

      制定本规程是为了规范微生物菌种常规保藏技术操作，加强管理，以达到保护微生物菌种资源，利用微生物菌种资源及实现资源共享的目的。

 

 

1 范围

本规程规定了微生物菌种常规保藏技术的基本原则和方法。

本规程适用于微生物菌种的常规保藏工作。

2 定义

本规程采用下列定义。

2.1

微生物菌种资源  microorganism  resources

指可培养的有一定科学意义、具有实际或潜在实用价值的古菌、细菌、真菌、病毒、细胞株等及其相关信息数据。

2.2

菌种保藏  culture  preservation

是指将微生物菌种用各种适宜的方法妥善保藏，避免死亡、污染，保持其原有性状基本稳定。

2.3

定期移植保藏法  subculturing

亦称传代培养保藏法，包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中，最适条件下培养，待生长充分后，于4℃－6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。

2.4液体石蜡保藏法  preservation  under  liquid  paraffin

亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上，最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于4℃－15℃进行保存的一种菌种保藏方法。

2.5

沙土管保藏法    sand  preservation

亦称载体保藏法。是指将培养好的微生物细胞或孢子用无菌水制成悬浮液,注入灭菌的沙土管中混合均匀，或直接将成熟孢子刮下接种于灭菌的沙土管中，使微生物细胞或孢子吸附在载体上，将管中水分抽干后熔封管口或置干燥器中于4℃－15℃进行保存的一种菌种保藏方法。

3.基本原则

3.1应针对菌种特性选择适宜方法进行保藏。

3.2应保证菌种保藏的安全性，不能对周围环境造成污染和危害。

4方法

4.1定期移植保藏法

见附录A。

4.2液体石蜡保藏法

见附录B。

4.3沙土管保藏法

见附录C。