附录 A   培养基和试剂的配制
A1  碱性蛋白胨水（APW）
蛋白胨                10.0g　　
氯化钠                10.0g　　
蒸馏水　              1 000mL 　　
混匀后，调节pH值至（8.5±0.2），分装225mL于250mL广口瓶中，121℃高压灭菌10min。
A2  TCBS琼脂
酵母浸膏 　　               5.0g　　
蛋白胨 　　　               10.0g
蔗　糖 　　　               20.0g　　
硫代硫酸钠·5H2O 　         10.0g
柠檬酸钠 ·2H2O　           10.0g
牛胆酸钠                    3.0g　　
牛胆汁                      5.0g　  
氯化钠 　                　 10.0g　　
柠檬酸铁　                  1.0g　　
溴麝香草酚蓝　              0.04g　　
麝香草酚蓝                  0.04g
琼　脂 　　                 18.0g
蒸馏水 　　                 1 000mL 
除指示剂外,将各种成分加热溶解,调至pH8.6,加入指示剂。此培养基不必高压灭菌,煮沸1～2min,分装20mL于15mm×100mm平皿内。
A3  三糖铁琼脂（TSI）
牛肉浸膏　　                3.0g
蛋白胨 　　                 20.0g
乳 糖 　　                  10.0g
蔗　糖 　　                 10.0g
葡萄糖　                    1.0g
硫酸亚铁                    0.5g
氯化钠 　　                 30.0g
琼　脂 　　                 12.0g
酚　红　　　                0.024g
 除琼脂和酚红外,将其他成分用蒸馏水400mL微火加热溶解,同时将琼脂置于600mL蒸馏水中,浸泡数分钟后,加热煮沸使完全溶解。然后将以上两液混合均匀。调至pH7.4,  加入指示剂混匀,分装于15mm×150mm试管,每管3mL～4mL,115℃高压灭菌15min。灭菌后摆成斜面,使高层和斜面各约3cm。 
A4  双糖铁琼脂（KIA）
牛肉浸膏                   3.0g
酵母膏　　　　　　         3.0g
月示蛋白胨　　　　         15.0g
蛋白胨                      5.0g　　
         乳糖　　　　　　　          5.0g　　
         葡萄糖　　　　　　          1.0g
硫酸亚铁                    0.2g　　
         氯化钠　　　　　　          20.0g　　
         硫代硫酸钠　　　　          0.3g　　
         琼脂　　　　　　　          12.0g　　
         酚红　　　　　　　          0.024g　　
        蒸馏水　　　　　　          1 000mL　　
   将各成分溶解于蒸馏水中，充分混匀，搅拌加热，煮沸约1min。最终pH（7.4±0.2）。分装13mm×100mm试管，121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。   
   
   
   

 

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