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一、试验原理：
用于经防腐剂或消毒剂处理的样品增菌培养。
胰蛋白胨和葡萄糖为细菌生长提供营养,并中和醇类消毒剂；组氨酸可以中和醛类消毒剂，硫代硫酸钠可以中和含氯、碘消毒剂和过氧化物消毒剂，大豆卵磷脂和吐温80组合可以中和，季铵盐类消毒剂，酚类消毒剂和洗必泰等。
二、培养基配方（g/L）：
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胰蛋白胨 |
20.0 |
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组氨酸盐酸盐 |
1.0 |
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硫代硫酸钠 |
5.0 |
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葡萄糖 |
2.5 |
|
大豆卵磷脂 |
30.0 |
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pH 7.2±0.2 25℃ |
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三、试验方法：
1. 称取本品58.5g，另取吐温-80 20g加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装试管，121℃高压灭菌15分钟。
2. 制备质控菌株，使菌液浓度约为1000CFU/ml。
消毒剂中和试验：
1. 将消毒剂加入9ml中和剂试管中混匀，中和10min。同时将等量消毒剂加入与中和剂培养基相同体积的生理盐水管中混匀，静置10min。
2. 取质控菌株1ml，同时接种于中和完毕后的培养基和生理盐水中，混匀。同时取质控菌株1ml，接种于9ml生理盐水中，混匀，转接涂布TSA平皿。空白对照组应将1ml生理盐水接种于9ml生理盐水中，混匀，转接涂布TSA平皿。从加入质控菌株至转接的过程应在15min内操作完毕。将TSA平皿放置于36±1℃培养18-24小时。
增菌效果试验：
1.接种10-100CFU的质控菌株加入中和剂培养基中，36±1℃培养18-24小时，观察试管。
四、结果观察与解释
消毒剂中和试验：转接涂布TSA平皿后，将TSA平皿36±1℃培养18-24小时，观察结果。菌株+中和剂+消毒剂组的涂布计数菌数应与菌株+生理盐水组的涂布计数菌数相近。若菌株+中和剂+消毒剂组涂布计数明显偏少，则说明培养基不能中和该种类的消毒剂或消毒剂浓度超出了培养基的中和能力，应重新测试。
菌株+生理盐水+消毒剂组涂布计数结果应与空白对照组一致，若此组有大量细菌生长，则说明此消毒剂对测试菌无杀灭作用或消毒剂已失效，应重新测试。
培养基增菌效果实验，培养结束后中和剂培养基应明显浑浊，表明其对测试菌种增菌效果良好。
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