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    改良麦康凯肉汤(CT-MAC)原理和使用方法

    张辉
    录入时间:2023-10-23 15:08:54 来源:青岛龙8生物

    一、试验原理:

      该培养基用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的选择性增菌培养。

      蛋白胨提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子;乳糖为可发酵碳水化合物,可作为一种能量来源;3号胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;结晶紫对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、白喉杆菌,以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用,对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用;中性红为指示剂。

      添加剂:每瓶需配套添加10盒HB8659a改良麦康凯肉汤添加剂使用,每200mL改良麦康凯肉汤添加1支添加剂。


    二、培养基配方(g/L):

    蛋白胨

    20.0

    乳糖

    10.0

    3号胆盐

    1.5

    氯化钠

    5.0

    中性红

    0.03

    结晶紫

    0.001

    pH值7.2±0.1(25℃)


    三、试验方法:

      1. 称取本品36.5g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却45℃±1℃时,加入1支改良麦康凯肉汤添加剂,混匀,分装无菌试管,每管9mL,备用。

      2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。

      3. 选择适宜稀释度的菌悬液接种于培养基中。

      4. 放置于36℃±1℃需氧培养17h-19h,观察试验结果。


    四、试验结果判断:

      接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养17h-19h,试验结果如图1所示。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量

    (CFU)

    参比或

    数培

    养基

    生长情况

    其他特征

    大肠杆O157

    大肠埃希氏菌

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 35150

    ATCC 25922

    ATCC 6538

    10-100

    1000-5000

    1000-5000

    TSA

    在CT-MAC上>10CFU

    菌落无色,

    中心灰褐色

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    1000-5000

    TSA

    在TSA上<10CFU


    金黄色葡萄球菌

    ATCC 6538

    1000-5000

    TSA

    在TSA上<10CFU



    图1 改良麦康凯肉汤(CT-MAC)微生物质控结果

    图2 培养液接种的试验结果


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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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