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    酚红煌绿琼脂的使用方法与原理

    纪英姿
    录入时间:2023-9-22 15:03:36 来源:青岛龙8生物

    一、用途:

      用于饲料中沙门氏菌分离培养。


    二、实验原理:

      蛋白胨、酵母浸粉,牛肉浸粉提供氮源、维生素和矿物质;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠维持均衡的渗透压;乳糖和蔗糖提供碳源;煌绿抑制革兰氏阳性菌和除了沙门氏菌外的大部分革兰氏阴性菌;酚红是pH指示剂;琼脂是凝固剂。


    三、培养基成分(g/L):

    蛋白胨

    10.0

    酵母浸粉

    3.0

    牛肉浸粉

    5.0

    磷酸氢二钠

    1.0

    磷酸二氢钠

    0.60

    乳糖

    10.0

    蔗糖

    10.0

    酚红

    0.09

    煌绿

    0.0125

    琼脂

    15.0

    pH 7.0±0.1 25℃


    四、试验方法:

      1、称取本品54.7g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,冷却至50-55℃左右时,倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌,当天制备当天使用。

      2、制备质控菌液。

      3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。

      4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

      5、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。


    五、酚红煌绿微生物灵敏度试验:

      按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24小时。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    参比或计

    数培养基

    方法

    质控评定标准

    其他特征

    金黄色葡萄球菌

    ATCC25923

    /

    /

    半定量

    G≤1

    /

    大肠埃希氏菌

    ATCC25922

    /

    /

    G≤1

    /

    福氏志贺氏菌

    ATCC13124

    /

    /

    G≤1

    /

    伤寒沙门氏菌

    ATCC14028

    20-200

    TSA

    定量

    PR≥0.7

    粉白色菌落,菌落

    周围稍变红

    鼠伤寒沙门氏菌

    CMCC(B)50115

    20-200

    PR≥0.7

    粉白色菌落,菌落

    周围稍变红


    图1-2 酚红煌绿琼脂微生物质控结果

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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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