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      氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂的使用方法与原理

      李琳
      录入时间:2023-8-28 14:58:37 来源:青岛龙8生物

      一、用途:

        用于蜂蜜中嗜渗酵母菌计数。

        添加剂:每瓶需配套添加8盒HB0296-1a氯霉素溶液使用,每支添加于200ml氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂中。


      二、实验原理:

        酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必需的微量元素;葡萄糖提供碳源;氯霉素抑制细菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂;氯硝胺可抑制霉菌菌落蔓延生长;甘油维持一个较低的渗透压。


      三、培养基成分(g/L):

      酪蛋白胨

      5.0

      葡萄糖

      10.0

      磷酸二氢钾

      1.0

      硫酸镁

      0.5

      氯硝铵

      0.002

      琼脂

      15.0

      pH 5.6±0.2   25℃


      四、试验方法:

        称取本品31.5g,另取无水甘油200g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每200ml培养基中加入1支氯霉素溶液(20mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。


      五、氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂微生物灵敏度试验:

        按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置25±1℃需氧培养48-168h。

        注:回收率计算时,用PDA琼脂做对照培养基。

      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      参比或计数培养基

      回收率

      生长情况

      其他特征

      酵母菌

      ATCC18790

      10-100

      PDA

      ≥70%

      +++

      白色菌落

      白色念珠菌

      ATCC10231

      10-100

      PDA

      ≥70%

      +++

      白色菌落

      大肠埃希氏菌

      ATCC25922

      100-1000

      PDA

      /

      -

      /

        不同细菌在氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂上的生长特征:


      a:白色念珠菌
      b:酵母菌
      c:大肠杆菌


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      注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

       

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