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    假单胞CFC选择性培养基的原理和使用方法

    刘浩然
    录入时间:2023-6-28 15:16:32 来源:青岛龙8生物

    一、用途及试验原理

      本培养基用于假单胞菌选择性分离培养。

      明胶蛋白胨、酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和生长因子;硫酸钾和氯化镁可促进铜绿色素的产生;琼脂为凝固剂;甘油可增强假单胞菌产生色素与荧光;CFC选择性培养基添加剂可抑制除假单胞菌以外的杂菌生长。


    二、培养基配方(g/L)

    明胶蛋白胨

    16.0

    酸水解酪蛋白

    10.0

    硫酸钾

    10.0

    氯化镁

    1.4

    琼脂

    12.0

    pH 7.1±0.2(25℃)


    三、试验方法

      1、称取本品49.4g,另取10g甘油加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,每瓶加入一支假单胞菌CFC选择性培养基添加剂(HB8689ad),混匀,备用。

      2、制备菌种悬液,涂布接种至假单胞CFC选择性培养基中。

      3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。


    四、质控结果

      接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    回收率

    生长情况

    其他特征

    铜绿假单胞菌

    ATCC 9027

    10-100

    ≥70%

    +++

    有绿色色素,产荧光

    铜绿假单胞菌

    ATCC 27853

    10-100

    ≥70%

    +++

    有绿色色素,产荧光

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    100-1000

    /

    -

    抑制

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    100-1000

    /

    -

    抑制


    图1假单胞CFC选择性培养基的微生物质控结果

    图1假单胞CFC选择性培养基的微生物质控结果


    五、注意事项

      1、培养基中含少量氯化镁,灭菌后可能出现微量沉淀。

      2、本培养基需额外添加甘油,由于甘油粘稠不易吸取,很容易造成添加量偏差。可采取裁剪移液器吸头尖使其口径扩大的方式进行吸取,操作注意平稳缓慢。

      3、假单胞菌CFC选择性培养基添加剂为冻干固体,加1 mL无菌蒸馏水复溶后使用。

      4、与CN琼脂的区别:

      ① 从成份上:主要成分两者相同,不同的是他们选择的抑菌剂不同;

      ② 假单胞CFC选择性培养基是用来推荐分离假单胞菌属。CN琼脂是推荐分离铜绿假单胞菌(又称绿脓假单胞菌或绿脓杆菌)。


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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。


     

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