1）培养基平皿表面水珠凝聚，造成涂布培养后菌落蔓延无法计数。
2）培养后计数结果超标。
3）培养后没有逐日观察，造成菌落生长成团，无法计数或计数结果统计错误。
2、原因分析及解决措施
情况①：培养基平皿表面水珠凝聚的原因在于浇碟的时候，培养基温度高，在平皿表面会形成水珠。
解决措施：培养基平皿表面水珠凝聚
◆培养基制备
培养基制备的一般流程：
①上午10点开始用干粉培养基天平称重，11点20开始灭菌，13:00开锅，在灭菌锅中冷却至13:30。
②将对照培养基置于50℃水浴锅中待用。
知识点：灭菌锅灭菌结束时，需要及时开锅，避免培养基长时间在灭菌锅中缺氧，造成培养基品质下降，培养基适用性失败且影响实验结果。
◆培养基浇碟
50℃水浴锅取出后，一般5分钟之内将培养基浇置空平皿中。平皿冷却后，观察培养基表面有无水珠，若无水珠则可直接进行涂布操作。多余的培养基可以放置在生物安全柜中或置密封袋（不是呼吸袋）里2-8℃保存。
若有水珠，若需要当天使用则打开平皿盖，轻轻甩掉表面的水珠，在运行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面没有水珠，然后进行涂布计数。
若不需要当天使用：
直接放置在生物安全柜中，盖上平皿，生物安全柜关机，7天内使用。
装入自封袋中保存在2-8℃冰箱中，2周内使用。使用前，提前一天取出，使平皿中水珠自动蒸发消失。
情况②：培养后计数结果超标的原因在于菌悬液制备不均匀。
每次制备的时候要涡旋3000转30s，使用前再涡旋3000转10s。特别是黑曲霉和白色念珠菌这种容易在底部沉底的菌，尤其需要注意。
情况③：培养后没有逐日观察，造成菌落生长成团。
无法计数或计数结果统计错误，可以参考下图解决这个问题。
文章来源：微信公众号微生物菌种网
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