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    粪肠球菌琼脂培养基的原理和使用方法

    张宇名
    录入时间:2023-1-29 16:08:45 来源:青岛龙8生物

    一、试验用途及原理

      本培养基用于粪肠球菌选择性分离培养。

      䏡胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖、乳糖为可发酵糖类;甘油磷酸钠为培养基碳源,也起到一定的缓冲作用;氯化钠维持细菌平衡的渗透压;叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌生长;溴甲酚紫为指示剂染料;琼脂是凝固剂。粪肠球菌能将TTC(氯化三苯基四氮唑)还原成一种酸性的偶氮染料,显示为深红色菌落。


    二、培养基配方(g/L)

    䏡胨

    10.0

    麦芽糖

    20.0

    酵母浸粉

    10.0

    甘油磷酸钠

    10.0

    氯化钠

    5.0

    乳糖

    1.0

    溴甲酚紫

    0.015

    叠氮钠

    0.4

    TTC

    0.1

    琼脂

    13.0

    pH7.3±0.2(25℃)


    三、试验方法

      1、称取本品70.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸5分钟,冷至50℃左右,倾入无菌平皿,备用。

      2、制备菌种悬液,接种到粪肠球菌琼脂培养基上。

      3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养48 h。


    四、质控结果

      接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养48 h。菌株划线培养结果见图1,菌株涂布培养结果见图2。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    回收率

    生长情况

    其他特征

    粪肠球菌

    ATCC 29212

    10-100

    ≥50%

    +++

    淡红色小菌落

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    /

    /

    -

    抑制

    鼠伤寒沙门氏菌

    ATCC 14028

    /

    /

    -

    抑制

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    /

    /

    -

    抑制


    粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(划线培养)

    图1 粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(划线培养)

    粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(涂布培养)

    图2 粪肠球菌琼脂培养基的微生物质控结果(涂布培养)


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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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