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    强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)原理和使用方法

    丁鑫鑫
    录入时间:2023-1-17 10:45:48 来源:青岛龙8生物

    一、试验用途及原理:

      用于食品和其他物质中梭菌的培养和计数。

      胰酪蛋白胨,牛肉浸粉,蛋白胨,可溶性淀粉,酵母浸粉和L-半胱氨酸盐提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;刃天青是氧化还原指示剂;醋酸钠可抑制革兰氏阴性菌;柠檬酸铁铵和亚硫酸钠是硫化氢指示剂;琼脂是培养基凝固剂。


    二、培养基配方(g/L):

    胰酪蛋白胨

    5.0

    蛋白胨

    5.0

    牛肉浸粉

    8.0

    可溶性淀粉

    1.0

    酵母粉

    1.0

    葡萄糖

    1.0

    L-半胱氨酸盐酸盐

    0.5

    醋酸钠

    5.0

    刃天青

    0.002

    柠檬酸铁铵

    0.5

    亚硫酸钠

    0.75

    琼脂

    15.0

    pH 7.6±0.2 25℃


    三、试验方法:

      粉体装培养基的使用:

      1. 称取本品 42.75g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌15分钟,备用。

      2. 制备质控菌液。

      3. 吸取合适稀释度质控菌液1ml加入无菌平皿内,每个稀释度做两个平行。每个平皿倾注冷却至50℃的待测培养基15ml,缓慢旋转平皿,使质控菌液和培养基充分混匀。

      上述琼脂平板凝固后,再加入10ml冷却至50℃的待测培养基均匀覆盖平板表层。

      4. 待琼脂凝固后,正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


    四、结果观察与解释

      接种以下质控菌株,正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时:

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    参比或计数培养基

    方法

    质控评定标准

    其他特征

    产气荚膜梭菌

    ATCC13124

    20-200

    TSC

    定量

    PR≥0.7

    黑色菌落


    强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果

    图1-1 强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果


    五、注意事项

      本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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