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      LBS琼脂的试验方法以及现象

      李昊睿
      录入时间:2022-12-12 10:25:24 来源:青岛龙8生物

      一、试验原理:

        胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;柠檬酸铁铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铁铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。


      二、用途:

        用于乳酸杆菌的分离培养。


      三、培养基配方(g/L):

      酵母浸粉

      5.0

      胰酪蛋白胨

      10.0

      磷酸二氢钾

      6.0

      硫酸亚铁

      0.034

      硫酸镁

      0.575

      葡萄糖

      20.0

      乙酸钠

      25.0

      柠檬酸铵

      2.0

      硫酸锰

      0.12

      琼脂

      15.0

      pH 5.5±0.2   25℃


      四、试验方法:

        1.称取本品84.0g,再吸取吐温80 1ml和冰乙酸1.3ml,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,当日使用,无需高压灭菌。次日使用,需118℃高压灭菌15分钟。倾注无菌空平皿备用。

        注:该培养基溶解后有少量沉淀。

        2.制备质控菌液。

        3.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

        4.36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


      五、结果观察与解释

        接种以下质控菌株,在36±1℃培养24-48小时:

      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      参比或计数培养基

      方法

      质控评定标准

      其他特征

      嗜酸乳杆菌

      CICC6005

      20-200

      MRS培养基

      定量

      PR≥0.7

      白色突起菌落

      植物乳杆菌

      ATCC8014

      20-200

      MRS培养基

      定量

      PR≥0.7

      白色突起菌落


      植物乳杆菌ATCC8014
      嗜酸乳杆菌CICC6005

      植物乳杆菌ATCC8014

      白色凸起菌落

      嗜酸乳杆菌CICC6005

      白色凸起菌落

      图1 LBS琼脂微生物质控结果



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      注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。


       

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