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    LBS琼脂的试验方法以及现象

    李昊睿
    录入时间:2022-12-12 10:25:24 来源:青岛龙8生物

    一、试验原理:

      胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;柠檬酸铁铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铁铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。


    二、用途:

      用于乳酸杆菌的分离培养。


    三、培养基配方(g/L):

    酵母浸粉

    5.0

    胰酪蛋白胨

    10.0

    磷酸二氢钾

    6.0

    硫酸亚铁

    0.034

    硫酸镁

    0.575

    葡萄糖

    20.0

    乙酸钠

    25.0

    柠檬酸铵

    2.0

    硫酸锰

    0.12

    琼脂

    15.0

    pH 5.5±0.2   25℃


    四、试验方法:

      1.称取本品84.0g,再吸取吐温80 1ml和冰乙酸1.3ml,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,当日使用,无需高压灭菌。次日使用,需118℃高压灭菌15分钟。倾注无菌空平皿备用。

      注:该培养基溶解后有少量沉淀。

      2.制备质控菌液。

      3.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

      4.36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


    五、结果观察与解释

      接种以下质控菌株,在36±1℃培养24-48小时:

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    参比或计数培养基

    方法

    质控评定标准

    其他特征

    嗜酸乳杆菌

    CICC6005

    20-200

    MRS培养基

    定量

    PR≥0.7

    白色突起菌落

    植物乳杆菌

    ATCC8014

    20-200

    MRS培养基

    定量

    PR≥0.7

    白色突起菌落


    植物乳杆菌ATCC8014
    嗜酸乳杆菌CICC6005

    植物乳杆菌ATCC8014

    白色凸起菌落

    嗜酸乳杆菌CICC6005

    白色凸起菌落

    图1 LBS琼脂微生物质控结果



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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。


     

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