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    Todd-Hewitt琼脂培养基原理和使用方法

    张辉
    录入时间:2022-6-1 15:44:52 来源:青岛龙8生物

    一、试验原理:

      用于链球菌的分离培养。

      细菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠用于维持细胞渗透压;碳酸钠和磷酸氢二钠提供无机盐以及作为缓冲剂维持培养基的pH;琼脂作为培养基的凝固剂。


    二、培养基配方(g/L):

    细菌蛋白胨

    20.0

    牛心浸粉

    3.1

    碳酸钠

    2.5

    葡萄糖

    2.0

    氯化钠

    2.0

    磷酸氢二钠

    0.4

    琼脂

    15.0

    pH值7.8±0.2(25℃)


    三、试验方法:

      1. 称取本品45.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。

      2. 制备质控菌液;

      3. 选择合适稀释度的质控菌液100 μL,均匀涂布于待测培养基上,用TSA琼脂做对照培养基,计算回收率;

      4. 放置36±1℃需氧培养24-48小时,记录试验结果。


    四、试验结果判断:

      接种以下质控菌株,放置于36±1℃需氧培养24-48小时。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量

    (CFU)

    回收率

    生长情况

    其他特征

    溶血性链球菌

    CMCC(B) 32210

    10-100

    ≥70%

    +++

    白色小菌落

    粪链球菌

    ATCC 29212

    10-100

    ≥70%

    +++

    白色小菌落

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    10-100

    ≥70%

    +++

    乳白色大菌落

    化脓性链球菌

    ATCC 19615

    10-100

    ≥70%

    +++

    白色小菌落



    图1 Todd-Hewitt琼脂培养基微生物质控结果


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    注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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