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        甘露醇卵黄培养基基础原理和使用方法

        丁鑫鑫
        录入时间:2021-10-20 10:36:43 来源:青岛龙8生物

        一、试验原理:

          用于分离培养病原性金黄色葡萄球菌。

          蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂,金黄色葡萄球菌可分解培养基中的甘露醇产酸,使菌落周围变黄,并能降解卵黄中的卵磷脂使菌落产生晕圈。


        二、培养基配方(g/L):

        蛋白胨

        10.0

        D-甘露醇

        10.0

        牛肉粉

        2.5

        氯化钠

        75.0

        酚红

        0.025

        琼脂

        15.0

        pH 7.4±0.2 25℃


        三、试验方法:

          粉体装培养基的使用:

          1. 称取本品112.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至45-50℃时,无菌操作,加入50%卵黄乳液30ml,摇匀,倾入无菌平皿,备用。

          2. 制备质控菌液。

          3. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

          4. 36±1℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。


        四、结果观察与解释

          接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养24-48小时:

        质控菌株

        菌株编号

        接种量(CFU)

        参比或计数培养基

        方法

        质控评定标准

        其他特征

        大肠埃希氏菌

        ATCC25922

        /

        /

        半定量

        G≤1

        /

        伤寒沙门氏菌

        ATCC14028

        /

        /

        G≤1

        /

        金黄色葡萄球菌

        ATCC6538

        20-200

        TSA

        定量

        PR≥0.7

        黄色菌落,菌落周围有晕圈

        金黄色葡萄球菌

        ATCC25923

        20-200

        PR≥0.7

        黄色菌落,菌落周围有晕圈

        表皮葡萄球菌

        CMCC(B)26069

        20-200

        PR≥0.7

        红色菌落,没有晕圈




        图1-1 甘露醇卵黄培养基微生物质控结果


        五、注意事项:

          本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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        注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

         

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