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      尿素酶生化管原理及实验现象

      王永兴
      录入时间:2021-8-23 13:55:28 来源:青岛龙8生物

      一、用途:

      用于细菌尿素酶反应。


      二、实验原理:

      产尿素酶的细菌分解尿素后产氨,pH上升培养基呈碱性,酚红为酸碱指示剂,变色范围为pH6.8-8.4,颜色由黄色变为红色。因此培养基颜色由橙色变为玫红色为尿素酶试验阳性。大多数尿素酶阴性细菌会分解培养基中少量的葡萄糖产酸,使培养基变黄,也有少数尿素酶阴性的细菌不分解葡萄糖,无颜色变化。培养基出现变黄或不变色均为尿素酶阴性反应。


      三、培养基配方(g/L):

      蛋白胨
      1.0
      葡萄糖
      1.0
      氯化钠
      5.0
      磷酸氢二钾
      2.0
      20%无菌脲溶液
      100mL
      酚红
      0.012
      pH 6.9±0.1 25℃

      四、试验方法:

        1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用。

        2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。

        3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中,36±1℃培养24-120h后,观察实验结果。


      五、结果观察与解释 :

        接种以下质控菌株,36±1℃培养24-120h:

      质控菌株
      菌株编号
      生长情况
      其他特征
      单增李斯特氏菌
      ATCC19114
      +++
      阴性,黄色
      大肠埃希氏菌
      ATCC25922
      +++
      阴性,黄色
      普通变形杆菌
      ATCC13315
      +++
      阳性,玫红色
      奇异变形杆菌
      ATCC14153
      +++
      阳性,玫红色
      鼠伤寒沙门氏菌
      ATCC14028
      +++
      阴性,黄色


      图1-1  尿素酶生化管质控结果

      备注:a:单增李斯特氏菌,b:大肠埃希氏菌,c:普通变形杆菌,d:奇异变形杆菌,e:鼠伤寒沙门氏菌,f:空白对照


      六、注意事项:

      本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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      注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

       

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