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    改良Skirrow氏琼脂基础的原理及实验现象

    纪英姿
    录入时间:2021-7-28 14:19:33 来源:青岛龙8生物

    一、用途


     用于空肠弯曲杆菌的分离培养(GB4789.9-2014,GB4789.28-2013,ISO标准)。


    二、实验原理


     蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠提供均衡的渗透压;无菌冻融脱纤维羊血提供额外的营养物质;硫酸亚铁、焦亚硫酸钠和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长;TMP、多粘菌素B和万古霉素可抑制样本中非弯曲菌的生长,从而便于分离空肠弯曲菌;琼脂是凝固剂。


    三、培养基配方(g/L)


    蛋白胨

    15.0

    酵母浸粉

    5.0

    胰酪蛋白胨

    2.5

    氯化钠

    5.0

    琼脂

    15.0

    pH7.4±0.2 25℃


     FBP溶液:丙酮酸钠、焦亚硫酸钠、硫酸亚铁各0.25g溶解于100mL纯化水中,用0.22μm微孔滤膜过滤除菌。


     抗生素溶液:称取头孢哌酮0.032g,两性霉素B0.01g,利福平0.01g,溶解于5mL 50%无菌乙醇溶液中。


     配制方法:称取基础培养基4.25g,加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50-55℃左右时,加入1ml过滤除菌的FBP浓原液、一支改良Skirrow氏琼脂基础添加剂1mL和无菌冻融脱纤维羊血5ml,混匀,倾入无菌平皿。


    四、试验方法


     1、制备质控菌液。


     2、将质控菌液划线接种于平板。


     3、42±1℃微需氧培养24-48小时,记录实验结果。


    五、结果观察与解释


     接种以下质控菌株,42±1℃微需氧培养24-48小时:

    质控菌株

    菌株编号

    生长情况

    其他特征

    空肠弯曲菌

    ATCC33291

    +++

    灰色扁平湿润有光泽,呈沿接种线向外扩散

    大肠埃希氏菌

    ATCC25922

    -

    /

    金黄色葡萄球菌

    ATCC25923

    -

    /


     改良Skirrow氏琼脂基础质控结果:






    空肠弯曲菌

    灰色扁平湿润有光泽,呈沿接种线向外扩散


    大肠埃希氏菌

    抑制


    金黄色葡萄球菌

    抑制


    六、注意事项


     本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

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     注:本文属龙8生物原创,未经允许不得转载。

     

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