一、试验用途和原理

  该培养基主要用于用于卫生环境表面微生物计数和分离培养。

 胰蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；硫代硫酸钠、硫乙醇酸钠、亚硫酸氢钠、卵磷脂和吐温80为中和剂，可中和醛类消毒剂、含氯消毒剂、含碘消毒剂、季铵盐类消毒剂、过氧化物消毒剂等多种消毒剂的消毒作用；溴甲酚紫是酸碱指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方（g/L)

胰蛋白胨	5.0
酵母粉	2.5
葡萄糖	10.0
硫代乙醇酸钠	1.0
硫代硫酸钠	6.0
亚硫酸氢钠	2.5
溴甲酚紫	0.02
卵磷脂	7.0
琼脂	15.0
pH值7.6±0.2	25℃

三、试验方法

 1.称取本品49g，另取吐温-80 5g加入，混匀，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水，分装，121℃高压灭菌15分钟后，将灭菌完毕的培养基倾入无菌平皿中，备用。

 2.将质控菌株稀释至合适梯度，使最终细菌含量为100-1000CFU/mL。

 3.用移液枪吸取质控菌株100μL加入备用的平皿中，涂布使菌液在培养基表面均匀涂开。

 4.将接好菌种的培养基放置于36±1℃需氧环境中倒置培养40-48小时。

四、实验结果

 D/E中和琼脂实验结果：

大肠埃希氏菌 黄色菌落				金黄色葡萄球菌 黄色菌落
鼠伤寒沙门氏菌 黄色菌落				铜绿假单胞菌 紫色菌落
枯草芽孢杆菌 紫色菌落

五、注意事项

 本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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