一、试验原理

 TCBS琼脂用于致病性弧菌的选择性分离（GB、SN标准）。成分中的酵母浸粉、蛋白胨提供菌体生长所需的氮源、碳源及维生素等各种生长因子；较高浓度的氯化钠提供了弧菌嗜盐生长的环境，其形成的高渗透压抑制了其他细菌的生长；蔗糖是可发酵碳源；枸橼酸钠、高pH碱性环境及硫代硫酸钠的存在抑制肠道菌的生长，另硫代硫酸钠还提供硫源，在柠檬酸铁存在的条件下可以检测细菌产硫化氢；牛胆粉、牛胆酸钠主要抑制革兰氏阳性菌的生长；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为酸碱指示剂，在该平板上生长的细菌若能利用蔗糖产酸，则使得混合指示剂（溴麝香草酚兰和麝香草酚兰）的颜色变成黄色；琼脂起凝固的作用。

二、培养基配方（g/L）

三、试验方法

 1.称取本品89g，煮沸溶解于1000mL蒸馏水（可根据培养需要扩大或缩小产品用量），冷至45-50℃，倾入无菌平皿，备用；

 2.质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成；

 3.取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中；

 4.将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱，于36±1℃需氧培养18-24h，观察实验结果。

四、试验结果判断

 1.外观

 此培养基煮沸灭菌后制备好的固体平板为绿色。

 2.生物学实验

 接种以下质控菌株，放入培养箱中，于36±1℃培养24±2h，观察试验结果。

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	参比或计数培养基	方法	质控情况
副溶血性弧菌	ATCC17802	20-200	3%NaCl TSA	定量	PR≥0.2，蓝绿色斗笠状菌落，H2S阴性
溶藻弧菌	ATCC33787	20-200	3%NaCl TSA	定量	PR≥0.2，黄色菌落，H2S阴性
霍乱弧菌	/	20-200	3%NaCl TSA	定量	PR≥0.2，黄色菌落，H2S阴性
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	/	/	半定量	G≤1
大肠埃希氏菌	ATCC25922	/	/	半定量	G≤1

 TCBS琼脂微生物质控结果：

副溶血性弧菌 蓝绿色斗笠状菌落，H2S阴性		溶藻弧菌 黄色菌落，H2S阴性		霍乱弧菌 黄色菌落，H2S阴性

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