一、培养基用途

 mCPC培养基用于致病性弧菌的选择性分离。

二、检验原理

 蛋白胨、牛肉粉作为培养基中的基础营养物质，提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子；氯化钠维持培养基体系的渗透压平衡；多粘菌素B和多粘菌素E能抑制副溶血性弧菌和溶藻弧菌等非目标菌的生长；纤维二糖为可发酵的糖类；溴百里酚兰和甲酚红为pH指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。本培养基一纤维二糖作为鉴别剂，创伤弧菌可发酵纤维二糖产酸显黄色。

三、培养基配方（g/L）

蛋白胨	10.0
氯化钠	20.0
琼脂	15.0
甲酚红	0.04
溴百里酚兰	0.04
牛肉粉	5.0
pH值7.5-7.7	25℃

四、试验方法

 1.称取本品5.0克，加热煮沸溶解90mL蒸馏水中，冷却到48-55℃时加入10%纤维二糖水溶液10mL和1支mCPC添加剂（多粘菌素E 40000units和多粘菌素B 10000units）混匀，倾入无菌空平皿，无需高压灭菌；

 2.制备质控菌液；

 3.目标菌（创伤弧菌）：选择合适稀释度的质控菌液100μL，均匀涂布于待测培养基上，每一稀释度接种两个平板；非目标菌（特异性）：使用1μL接种环挑取1环霍乱弧菌菌液，定性划线接种于待测平板；非目标菌（选择性）：分别使用1μL接种环挑取1环副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌菌液，在待测平板表面划六条平行线；

 4.放置36±1℃需氧培养24-48小时，记录试验结果。

五、试验结果判断

 接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	参比或计数培养基	方法	质控结果	其他特征
副溶血性弧菌	ATCC17802	/	/	半定量	G≤1	抑制
霍乱弧菌	/	/	/	定性	/	紫色菌落
创伤弧菌	ATCC27562	20-200	3%NaCl TSA	定量	PR≥0.1	圆形扁平，中心不透明， 边缘透明的黄色菌落
大肠埃希氏菌	ATCC25922	/	/	半定量	G≤1	抑制
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	/	/	半定量	G≤1	抑制

 mCPC培养基质控结果：

副溶血性弧菌 抑制		霍乱弧菌 紫色菌落		金黄色葡萄球菌 抑制

大肠埃希氏菌 抑制				创伤弧菌 圆形扁平，中心不透明，边缘透明的黄色菌落

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