芽孢通常可在革兰氏染色片中看到，但在不易清晰观察时，可用特殊的芽孢染色法，使芽孢与菌体分别呈现不同颜色，便于观察。

（一）孔雀绿染色法

   （1）将生有芽孢的斜面菌苔按革兰氏染色法涂片后用饱和的孔雀绿(Malachite green)水溶液（约为7.6%）染10min

   （2）用自来水冲洗

   （3）用0.5％番红液复染30s

   （4）水洗，吸干

   （5）镜检：芽孢呈绿色，菌体和芽孢囊呈微红色，但应注意菌体中有异染粒时，也可呈现绿色。

(二）石炭酸复红染色法

   1.染剂

   （1）石炭酸复红液

    两液相混摇匀备用。

   （2）酸性乙醇

   （3）吕氏美蓝染液

    将两液混合后备用，此液陈旧者更好。

   2.染色步骤

   （1）按常规涂片。

   （2）滴加石炭酸复红于涂片上，并于玻片下缓缓加热，使染液冒蒸气但不沸腾，并继续滴加染液，不使涂片上染液蒸干，这样保持5 min。

   （3）涂片冷后，倾去染液，用酸性乙醇脱色至无红色染剂洗脱为止。

   （4）彻底水洗。

   （5）用吕氏美蓝复染2～3 min。

   （6）水洗、吸干、镜检。

   3.观察结果

    镜检时，菌体及孢囊呈蓝色，芽孢呈红色。

    本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十二章。

上一篇：下一篇：荚膜的染色方法