李斯特氏菌显色培养基是青岛高科园龙8生物技术有限公司研制,可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在3天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色,菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长,抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。
成份(g/L)
基础培养基(g/L):
营养物质
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70.0
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显色剂
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6.0
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pH 7.2±0.2 25℃
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李斯特氏菌添加剂6.0g、李斯特氏菌抑菌剂(冻干粉)1ml*5支 (已配套,无需另购)
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法
称取基础培养基14.2g,加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动1-2min,使其混合均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15min。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为2-3mm,这样有利观察不透明环。
注:培养基中有少量金属盐,灭菌后可能出现微量沉淀。
操作步骤
使用前,把制备好的培养基放置室温10-20分钟。
1、按SN标准、GB标准、FDA标准、ISO标准或其它标准制备样品液;
2、把样品液加入李氏增菌肉汤(LB1、LB2)中增菌;或把样品液和Half-Fraser增菌液按照 1:10 的比例混匀,30℃培养24小时;或其它增菌液中增菌培养;
3、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上,36±1℃培养24-48小时。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。
2、微生物试验
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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不透明环
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单增李斯特氏菌
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19114
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+++
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蓝色
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+
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绵羊李斯特氏菌
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CICC21663
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+++
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蓝色
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+
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斯氏李斯特氏菌
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CICC21671
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+++
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蓝色
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-
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-
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-
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-
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大肠埃希氏菌
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25922
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-
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-
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-
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鼠伤寒沙门氏菌
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14028
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-
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-
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-
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黑曲霉
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16404
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-
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-
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-
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典型特征
单增李斯特氏菌36±1℃培养24-28小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌36±1℃培养48小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。斯氏李斯特氏菌36±1℃培养24-48小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
贮存
制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度2-8℃。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1、VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
2、HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichkse. Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).
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不同细菌在李斯特氏菌显色培养基上的生长特征:
李斯特氏菌显色培养基的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置37℃需氧培养24-48小时。
相关资料:
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李斯特氏菌的初步检测 点击查看
李斯特氏菌显色平板的制备 点击查看
李斯特氏菌显色培养基原理和使用方法 点击查看