大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)是青岛龙8生物公司再次改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌和大肠菌群的快速检测。大肠杆菌显蓝色至紫色,大肠菌群显红色,革兰氏阳性菌被抑制。
成份(g/L)
特殊营养物质
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33.0
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混合显色剂
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0.3
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琼脂
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13.0
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pH 7.0±0.2 25℃
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此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法
称取本品46.3g,加入1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至45-50℃培养基约15ml,混匀,凝固后,再加入一层培养基进行履盖。
或冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在超净工作台中开盖吹15-30分钟,去掉培养基表面水汽,加入适当稀释度的样品液1ml,涂布于培养基上,36±1℃培养18~24h。
操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36±1℃培养18~24h,选用有30~200个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群和大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落;
总大肠菌群=蓝色菌落+紫色菌落+粉红色菌落 大肠杆菌=蓝色菌落+紫色菌落;
4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36±1℃培养12-16小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装4种x4套)。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色至淡粉红色。制备好的平板呈无色半透明固体培养基,稍有些沉淀物。
2、微生物试验
在36±1℃培养18~24h:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-/+
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无色
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大肠杆菌
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25922
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+++
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蓝绿色
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沙门氏菌
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14028
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+++
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无色
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阴沟肠杆菌
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23355
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+++
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粉红色
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产气肠杆菌
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35029
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+++
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粉红色
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弗氏柠檬酸盐杆菌
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43864
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+++
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粉红色
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肺炎克雷伯氏菌
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10031
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+++
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粉红色
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方法的局限性
本培养基鉴定大肠菌群/大肠杆菌,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色,大肠菌群为粉红色菌落,其它细菌为无色菌落。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。
参考文献
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
3、LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bact riologique, en particulier des Enterobacteriaceae.Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102; 267-277 (1962).
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大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。
注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。
相关资料:
操作视频|培养基的加热灭菌操作(以XLD 、SC为例)-点击查看实验操作视频
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)使用说明书 点击下载
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基原理及使用方法 点击查看