用途:用于沙门氏菌选择性增菌培养。
成分(g/L):
Soya peptone / 大豆蛋白胨
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4.5
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Magnesium Chloride Hexahydrate /六水合氯化镁
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29.0
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Sodium Chloride / 氯化钠
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8.0
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Dipotassium Phosphate / 磷酸氢二钾
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0.4
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Potassium Dihydrogen Phosphate / 磷酸二氢钾
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0.6
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Malachite Green / 孔雀石绿
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0.036
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pH值5.2 ± 0.2
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25℃
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培养基组分说明
除了微生物生长必须的碳源、氮源外,还有孔雀绿和六水合氯化镁。孔雀绿的主要用途是抑制杀灭真菌、大肠菌群;六水合氯化镁的用途是抑制变形杆菌和大肠杆菌的生长。
在这里,美国药典和欧洲药典并未说明不同培养基组分的混合顺序,但是中国药典明确了除了孔雀绿外,其他要先混合溶解,之后才加入孔雀绿,然后进行灭菌。
原因是:孔雀绿为有毒的致癌物,尽量减少与之接触。不过,除了培养基生产企业,现在的药厂都是购买成品干粉或颗粒培养基,按照供应商的说明书,直接称取相应的干粉或颗粒重量,加入纯化水即可。
另外,这里需要注意的是,与其他常用的培养基的灭菌条件121℃不同的是,该培养基灭菌温度为不超过115℃。
那为什么会不一样呢,原因在于六水合氯化镁。六水氯化镁又名水氯石、结晶氯化镁、卤片、卤粉,英文名magnesium chloride hexahydrate,分子量203。常温下为无色单斜晶体,呈柱状或针状或片状,有苦味,密度1.56g/cm3,易溶于水和乙醇,在湿度较大时,容易潮解。在空气中加热分解:
100℃时失去2分子结晶水;
在110℃开始失去部分氯化氢而分解,强热转为氧氯化物;
在熔点118℃时热熔分解,释放出HCl气体而变成氯氧化合物;
高温下加热则分解为MgO和HCl。
由上可知,该培养基不能用常规的121℃进行灭菌,所以药典规定了115℃灭菌。
用法:
Suspend 27.1 g/liter,dispense into tubes,autoclave 20 min at 115℃.
称取本品 27.1g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,分装试管,115℃高压灭菌 20 分钟,备用。
在RV沙门增菌液体培养基中,鼠伤沙门氏菌为浑浊;肠炎沙门氏菌为浑浊;
乙型副伤寒沙门菌为浑浊;大肠埃希氏菌为抑制或部分抑制;金黄色葡萄球菌为抑制。
RV沙门菌增菌液体培养基(USP标准)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养18-24小时。
RV肉汤的原理和使用方法:http://www.hb26du.com/asphtml/refere9962.htm